一、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的使用
細(xì)胞培養(yǎng)的一般過(guò)程，主要包括準(zhǔn)備、取材、培養(yǎng)和凍存復(fù)蘇4步。為保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用一196℃液氮溫度，將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養(yǎng)基，以一定的冷卻速度凍存，最終保存于液氮中。在極低的溫度下，細(xì)胞保存的時(shí)間幾乎是無(wú)限的。
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目前美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫(kù)或細(xì)胞銀行(ATCC)液氮凍存有3200個(gè)已經(jīng)過(guò)鑒定的細(xì)胞系(1992)，其中包括來(lái)自正常人和各種疾病患者的皮膚成纖維細(xì)胞系和來(lái)自不同物種的近75個(gè)雜交瘤細(xì)胞株。
二、胚胎冷凍保存技術(shù)
胚胎冷凍保存技術(shù)是指在低溫條件下利用低溫保護(hù)劑保存胚胎的一門(mén)技術(shù)。這一技術(shù)是20世紀(jì)后半葉隨著人工授精技術(shù)廣泛應(yīng)用而產(chǎn)生的，目前已成為了現(xiàn)代生命科學(xué)研究必備的手段之一。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理就是因?yàn)榈蜏亟档土伺咛?nèi)的變質(zhì)反應(yīng)速度，溫度越低，胚胎保存時(shí)間就越長(zhǎng)。
目前已研究出多種胚胎冷凍保存方法，包括慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法和玻璃化冷凍法等。其中玻璃化冷凍法的步驟如下：
①將胚胎在室溫下放人25%玻璃化溶液(VS液)中預(yù)處理15min;
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②將預(yù)處理后的胚胎放在高濃度(75%一90%)的VS液中保存20—40min;
③將經(jīng)過(guò)兩步抗凍劑處理的胚胎直接投入液氮中保存。
此外還可以用液氮罐保存菌種、疫苗、骨組織、精子等物質(zhì)，均可達(dá)到很好的長(zhǎng)期存儲(chǔ)的效果。
