冷凍治療過程中，組織和細胞經(jīng)歷凍結、融化等過程是導致其損傷的關鍵因素。
1、冷凍降溫時的作用
緩慢降溫時，低溫損傷源于“溶液效應”(即高溶液/溶質濃度下，細胞嚴重脫水);快速降溫時，低溫損傷源于致命的細胞內冰晶形成。一些細胞存在冷凍保存的最佳冷卻速率，證明了這一假說的合理性。
2、冷凍后復溫作用
快速復溫，組織在較高溫度的情況下，處于高濃度的電解質中，易于破壞;緩慢復溫，可使組織在真正溶解前(常在-10℃～0℃)再次形成冰晶，由此形成大冰晶破壞細胞膜。
3、細胞膜損傷
低溫使構成細胞膜的主要成分脂質-蛋白復合物變性，致使細胞破裂。
4、溫度休克
低溫引起的局部溫度突然下降致使細胞發(fā)生低溫性休克，引起細胞死亡。
5、血管性因素
冷凍引起血管痙攣，毛細血管內皮發(fā)生改變，血小板微血拴形成，血液有形成分破壞并形成凝塊。此外，在冷凍作用下，毛細血管通透性增加，從而引起血粘度增加，靜水壓改變，血流緩慢。冷凍區(qū)周圍動靜脈分流開放，也可造成血流減少，導致組織缺血缺氧性壞死。故有學者認為血管性因素所致微循環(huán)障礙是冷凍后組織壞死的主要原因。
6、臨界細胞容積學說
認為在冷凍區(qū)進展中，細胞水分喪失，細胞皺縮，只能耐受到最小容積。超過此極限，細胞就破壞，從而造成組織損傷。
7、凋亡 在冷凍的分子生物學研究過程中發(fā)現(xiàn)冷凍的邊緣區(qū)部分細胞有凋亡小體，部分細胞呈現(xiàn)凋亡過程。
二、液氮容器冷凍方法
1、液氮淺低溫冷凍：通過對細胞和組織無明顯損傷作用使局部皮膚治療溫度控制在-1℃～6℃之間，從而產(chǎn)生某些生物學效應以達到治療目的冷凍方法。液氮淺低溫冷凍作用機制：
(1)血管性因素：由于較弱的冷刺激，局部血管先保護性收縮，復溫后毛細血管反射性擴張，溫度升高，促進了血管的新生和改善了血管的舒縮功能;
(2)神經(jīng)系統(tǒng)因素：由于局部冷刺激，可通過神經(jīng)傳導，調節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能;同時，又通過反射作用于植物神經(jīng)，也調節(jié)了皮膚血管的收縮功能;
(3)表皮增生。
2、液氮深低溫冷凍：通過對細胞和組織產(chǎn)生損傷或壞死作用以達到治療目的的冷凍方法。自增壓液氮罐
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